產(chǎn)品介紹：

　本品是由一款新型高效的快速DNA Polymerase、Mg2+、dNTPs以及PCR穩(wěn)定劑和增強劑組成的預混體系，濃度為2×。本產(chǎn)品為康為世紀新型快速DNA聚合酶，具有*的擴增速度與穩(wěn)定性，延伸速度可達5 s/kb，最短十五分鐘完成PCR，長片段（大于3 kb）或者復雜模板可以采用10-30 s/kb的延伸速度或者較多循環(huán)數(shù)。MasterMix配方使整個反應體系非常穩(wěn)定，同時復雜模板也能得到有效擴增，超過98%的PCR擴增能一次成功。使用時只需要加入DNA模板和引物，補足水即可反應，可最大限度地減少人為誤差、降低污染和節(jié)約時間。

  本產(chǎn)品已加入染料（藍色），反應結(jié)束后可直接進行電泳檢測。擴增得到的PCR產(chǎn)物3′端附有一個“A"堿基，因此可直接用于T/A克隆，并適用于康為無縫克隆試劑盒（CW3034）、T4連接試劑盒（CW0805）和感受態(tài)產(chǎn)品（CW0812）。

 本產(chǎn)品主要適用于超快PCR、復雜模板、復雜二級結(jié)構(gòu)、對高保真性有要求的基因克隆等實驗和大規(guī)?；驒z測。

產(chǎn)品名稱：康為世紀 2×Flash MasterMix含染料PCR預混

產(chǎn)品貨號：CW3009H

質(zhì)量控制：

　經(jīng)檢驗無外源核酸酶活性；PCR方法檢測無宿主殘余DNA；能有效地擴增多種基因組中的單拷貝基因。

使用說明：

　以下舉例為以人基因組DNA為模板，擴增1 kb的片段的PCR反應體系和反應條件，實際操作中應根據(jù)模板、引物結(jié)構(gòu)和目的片段大小不同進行相應的改進和優(yōu)化。

實驗設(shè)定：

1.模板DNA量設(shè)定：

模板過量可能導致非特異性擴增或smear。50 μl PCR反應體系中模板DNA推薦使

用量如下：

-人基因組DNA 5 ng-500 ng

-大腸桿菌基因組DNA 50 pg-100 ng

-質(zhì)粒DNA 10 pg-1 ng

2.引物濃度設(shè)定：

引物濃度可設(shè)為0.1 μM-1.0 μM之間。引物濃度過低時可能導致擴增產(chǎn)物少。引物濃度過高會抑制特異性擴增，可能導致非特異性擴增。

3.退火溫度設(shè)定：

一般實驗中退火溫度比擴增引物的熔解溫度Tm低5℃，無法得到理想的擴增效率

時可適當降低退火溫度；發(fā)生非特異性反應時可適當提高退火溫度。對于復雜模

板，需要調(diào)節(jié)退火溫度實現(xiàn)高效擴增。

4.延伸時間設(shè)定：

延伸時間應根據(jù)所擴增片段大小設(shè)定。以下為推薦的延伸時間：

質(zhì)粒等簡單模板：5-15 s/kb；

常規(guī)基因組、cDNA模板：10-15 s/kb；

復雜模板、粗提模板：20-30 s/kb；

（延伸時間不宜過短應至少在5 s/kb以上，也不宜超過30 s/kb）。

5.循環(huán)數(shù)設(shè)定：

可根據(jù)擴增產(chǎn)物的下游應用設(shè)定循環(huán)數(shù)。如果循環(huán)次數(shù)太少，擴增量不足；如果

循環(huán)次數(shù)太多，錯配機率會增加，非特異性背景嚴重。所以在保證產(chǎn)物得率的前

提下應盡量減少循環(huán)次數(shù)。

保存條件：-20℃

產(chǎn)品訂購信息：

品牌             貨號                   名稱                               規(guī)格

康為世紀 CW3009H  2×Flash PCR MasterMix(Dye)    40 ml

產(chǎn)品名稱：康為世紀 2×Flash MasterMix含染料PCR預混

產(chǎn)品貨號：CW3009H

關(guān)于公司：

康為世紀是主要從事高附加值、高技術(shù)含量的生物試劑的研發(fā)與生產(chǎn)，為生命科學研究、基因檢測和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產(chǎn)品和服務?？禐槭兰o建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識產(chǎn)權(quán)的技術(shù)創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺，構(gòu)建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。

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紅榮微再作為RNA、NGS、ctDNA、qPCR的分子診斷專業(yè)供應商，以“傳遞科學價值，服務科學研究"為宗旨,努力為客戶提供質(zhì)量可靠、貨美價優(yōu)的分子診斷試劑耗材，與客戶攜手為中國分子診斷的發(fā)展而前行。