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病毒純化試劑盒的簡單層析過程介紹

更新時間:2016-08-16瀏覽:2451次

   腺病毒純化試劑盒是病毒純化試劑盒常見的一種類型,它有一個基于層析技術的完整的純化系統(tǒng),能讓你在短短3小時內(nèi)安全、快速簡便地純化和濃縮重組腺病毒。試劑盒有兩種規(guī)格,分別適用于大規(guī)模純化和小量嘗試。而且是同時從培養(yǎng)液和細胞中一起收獲病毒,從而獲得穩(wěn)定高產(chǎn),減少損失。病毒純化試劑盒產(chǎn)量穩(wěn)定——可放大性,易控性,穩(wěn)定性。無需氯化銫梯度/超速離心,3小時內(nèi)純化重組病毒。

  腺病毒純化試劑盒的幾種類型:

  1.腺病毒純化試劑盒:從1-2個T75培養(yǎng)皿的感染細胞培養(yǎng)液中純化腺病毒

  2.腺病毒大量純化試劑盒:從6-8個T75培養(yǎng)皿的感染細胞培養(yǎng)液中純化腺病毒

  3.腺相關病毒純化試劑盒:從1-2個T75培養(yǎng)皿的感染細胞培養(yǎng)液中純化腺相關病毒

  4.腺相關病毒大量純化試劑盒:從6-8個T75培養(yǎng)皿的感染細胞培養(yǎng)液中純化腺相關病毒

  下面介紹一下病毒純化試劑盒簡單的層析過程。

  沒有超速離心,取而代之的是一種由VIRAPUR推出的特殊的膜,能根據(jù)腺病毒*的表面特征,特異吸附腺病毒顆粒。試劑盒提供的一次性濾器——Adeno-X純化過濾器能適配一次性針管或者真空泵,當含有病毒的溶液流經(jīng)濾器,腺病毒顆粒即被濾器中的這種膜截留。截留的病毒顆??梢杂煤苄◇w積的洗脫液洗脫下來。這個過程,從收細胞到純化,只需要2—3小時可以搞定。

  這個純化系統(tǒng)由四個部件組成:儲液瓶、套管、濾器和真空系統(tǒng)。當然,濾器是整個組合中的關鍵部分。在標準制備試劑盒中,濾器連接BD Luer-Lok tip syring,以針筒作為另一個真空系統(tǒng)。Mega試劑盒則提供連接管,以便較大的Mega濾器可以連接真空泵。

  真空用于將腺病毒粗提液(即培養(yǎng)基上清和細胞裂解上清混合)從儲液瓶抽過濾器,經(jīng)過洗滌后濾器和Luer-Lok tip syring相連,用少量洗脫液洗脫病毒顆粒。節(jié)省濃縮過程。

  無論是純度還是效價,這個試劑盒的純化結果和氯化銫梯度離心的結果相當。病毒顆粒:可感染病毒的比例在25:1—100:1之間。而且這個方法無需額外訓練,簡單易行。標準試劑盒(K1654-1,-2)可以得到1012的病毒顆粒(1—5x1010 ifu)Mega試劑盒的產(chǎn)量是標準的10倍試劑盒提供所有重要的試劑,你只要準備PBS、DNase和針筒就可以了。你會發(fā)現(xiàn),純化腺病毒從未如此簡單過。

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